Ntụle Ọhụrụ Maka Mwepụta DNA Mmiri Gburugburu Ebe Obibi — Usoro Bigefei Na-eme Ka Nnyocha Sayensị Dị Ngwa

Ngwa a dabere na sistemụ nchekwa kachasị mma yana beads nano magnetik dị elu. DNA genomic na-ejikọ kpọmkwem na otu ọrụ dị na elu bead ma kewapụ ya n'okpuru ubi magnetik mpụga. Mgbe ọtụtụ usoro ịsacha dị nro iji wepụ protein, nnu, na ihe ndị ọzọ na-adịghị ọcha, a na-ewepụ DNA genomic dị ọcha nke ukwuu.

E mere ya kpọmkwem maka ihe nlele mmiri gburugburu ebe obibi, ngwa a na-ewepụta DNA nje bacteria a chịkọtara na akpụkpọ nzacha nke ọma, gụnyere nje bacteria Gram-negative na Gram-positive (ruo mkpụrụ ndụ nje bacteria 2 × 10⁹ kwa otu akpụkpọ nzacha). Ọ dakọtara na sistemụ mwepụta nucleic acid akpaaka zuru oke maka nhazi mmepụta dị elu. DNA ewepụtara dị mma ma enwere ike iji ya ozugbo maka PCR/qPCR, NGS, na ngwa ndị ọzọ dị n'okpuru ala.

Atụmatụ Ngwaahịa

1. Ike Mwepụta Bakteria nke Gburugburu Ebe Obibi

Ọ na-ewepụta nje bacteria Gram-negative na Gram-positive nke ọma site na ihe nlele mmiri, na-ekpuchi obodo nje bacteria a na-ahụkarị na gburugburu mmiri dị ọcha na mmiri, ma na-emezu ihe dị iche iche achọrọ maka nyocha.

2. Ịdị ọcha dị elu na mmụba dị elu

Ọ na-enye DNA dị ọcha nke ukwuu, na-enweghị ihe ndị na-egbochi ya, yana mkpụrụ osisi kwụsiri ike nke dabara adaba maka ngwa molekul ozugbo.

3. Ndakọrịta akpaghị aka na arụmọrụ dị elu

Dakọtara nke ọma na sistemụ mwepụta nucleic acid akpaka nke Bigfish, na-akwado nhazi oge nke ihe nlele 32 ma ọ bụ 96 n'otu oge, na-ebelata oge nhazi nke ukwuu ma na-eme ka arụmọrụ ụlọ nyocha ka mma.

4. Ọrụ dị mma ma dịkwa mfe iji

Ọ dịghị mkpa maka ihe ndị na-egbu egbu dịka phenol ma ọ bụ chloroform, nke na-ebelata ihe egwu nchekwa ụlọ nyocha. A na-etinye ihe ndị na-eme ka ihe dị n'ime ya n'ime efere olulu 96, na-ebelata njehie ọkpọkọ aka ma na-eme ka usoro ọrụ dị mfe.

Ngwa Ndị Dakọtara

Nnukwu azụ BFEX-16E

BFEX-32

BFEX-32E

BFEX-96E

Nsonaazụ Nnwale

E jiri akpụkpọ ahụ sachaa ihe nlele mmiri osimiri nke ruru 600 mL, e wee jiri ngwa mwepụ na nhicha DNA nke Bigfish magnetik nke dị na mmiri gburugburu ebe obibi tinyere ngwa ọrụ dakọtara ya na ngwaọrụ ahụ. E mechara nyochaa DNA ahụ e wepụtara site na agarose gel electrophoresis.