Nchọpụta nsogbu PCR Analyzer: Ajụjụ na azịza a na-ajụkarị

Ihe nyocha nke polymerase chain (PCR) bụ ngwaọrụ dị mkpa na bayoloji molecular, na-enye ndị nyocha ohere ịbawanye DNA maka ngwa sitere na nyocha mkpụrụ ndụ ihe nketa ruo nyocha ụlọ ọgwụ. Agbanyeghị, dị ka ngwaọrụ ọ bụla siri ike, onye nyocha PCR nwere ike izute nsogbu ndị na-emetụta arụmọrụ ya. Isiokwu a na-aza ajụjụ ụfọdụ a na-ajụkarị gbasara yaPCR analyzernchọpụta nsogbu ma na-enye ngwọta bara uru maka nsogbu nkịtị.

1. Gịnị kpatara mmeghachi omume PCR m anaghị abawanye?

Otu n'ime nsogbu ndị ọrụ na-enwekarị ihu bụ enweghị ike mmeghachi omume PCR iji bulie DNA lekwasịrị anya. Enwere ike ịsị nke a n'ihi ọtụtụ ihe:

Nhazi primer na-ezighi ezi: Jide n'aka na primer gị bụ kpọmkwem maka usoro ebumnuche ma nwee okpomọkụ na-agbaze kacha mma (Tm). Jiri ngwa ngwanrọ maka imewe primer ka ịzena njide na-enweghị nke akọwapụtara.

DNA ndebiri ezughi oke: Chọpụta na ị na-eji DNA ndebiri zuru oke. Obere nta ga-ebute adịghị ike ma ọ bụ enweghị nkwalite.

Ndị na-egbochi ihe n'ime ihe nlele: Ihe mmetọ dị na nlele ahụ nwere ike igbochi mmeghachi omume PCR. Tụlee ime ka DNA gị dị ọcha ma ọ bụ jiri usoro mmịpụta dị iche.

Ngwọta: Lelee nhazi ọkwa gị, welie ntinye ndebiri, wee hụ na nlele gị enweghị ihe mgbochi.

2. Gini mere ngwaahịa PCR m ji ezighi ezi nha?

Ọ bụrụ na nha ngwaahịa PCR gị abụghị ka a tụrụ anya ya, ọ nwere ike igosi nsogbu na ọnọdụ mmeghachi omume ma ọ bụ ihe eji eme ihe.

Nkwalite na-abụghị nke akọwapụtara: Nke a nwere ike ime ma ọ bụrụ na primer jikọtara na saịtị a na-atụghị anya ya. Lelee nkọwapụta nke primers site na iji ngwa dịka BLAST.

Okpomọkụ ntanye na-ezighi ezi: Ọ bụrụ na okpomoku na-ekpo ọkụ dị oke ala, njikọ na-abụghị nke akọwapụtara nwere ike pụta. Nkwalite ọnọdụ okpomọkụ site na gradient PCR.

Ngwọta: Kwenye nkọwapụta nke primer ma welie okpomoku na-agwụ ike iji kwalite izi ezi nke ngwaahịa PCR.

3. My PCR analyzer na-egosiputa ozi njehie. Kedu ihe m kwesịrị ịme?

Ozi mperi na onye nyocha PCR nwere ike ịdị egwu, mana ha na-enyekarị akara maka nsogbu ndị nwere ike.

Okwu nhazigharị: Gbaa mbọ hụ na edoziziri PCR nyocha nke ọma. Nleba anya na nhazi oge niile dị oke mkpa iji nweta nsonaazụ ziri ezi.

Otu Software: Mgbe ụfọdụ, chinchi software nwere ike ịkpata nsogbu. Malitegharịa ekwentị gị ma lelee maka mmelite ngwanrọ.

Ngwọta: Rụtụ aka na ntuziaka onye ọrụ maka koodu njehie akọwapụtara ma soro usoro nchọpụta nsogbu akwadoro. Nlekọta anya mgbe niile nwere ike igbochi ọtụtụ nsogbu.

4. Gịnị kpatara mmeghachi omume PCR m anaghị ekwekọ?

Nsonaazụ PCR na-ekwekọghị ekwekọ nwere ike bụrụ nkụda mmụọ n'ihi ọtụtụ ihe kpatara ya:

Ogo Reagent: Gbaa mbọ hụ na reagents niile, gụnyere enzymes, ihe nchekwa, na dNTPs, dị ọhụrụ ma dịkwa oke mma. Reagents mebiela ma ọ bụ meruo nwere ike ibute mgbanwe.

Nhazi Cycler Thermal: Ntọala okpomọkụ na-ekwekọghị ekwekọ nwere ike imetụta usoro PCR. Na-elele nhazi nke igwe na-ekpo ọkụ mgbe niile.

Ngwọta: Jiri reagents dị elu ma na-ahazi igwe igwe ọkụ gị mgbe niile iji hụ na nsonaazụ na-agbanwe agbanwe.

5. Kedu ka esi melite arụmọrụ mmeghachi omume PCR?

Ịkwalite arụmọrụ nke mmeghachi omume PCR nwere ike ime ka mkpụrụ dị elu na nsonaazụ a pụrụ ịdabere na ya.

Welie ọnọdụ mmeghachi omume: Nnwale site n'iji nchịkọta dị iche iche nke primers, DNA template na MgCl2. Mmeghachi omume PCR ọ bụla nwere ike ịchọ ọnọdụ pụrụ iche maka ịrụ ọrụ kacha mma.

Jiri enzymes nwere ntụkwasị obi dị elu: Ọ bụrụ na izi ezi dị oke egwu, tụlee iji DNA polymerase nke nwere ntụkwasị obi dị elu iji belata njehie n'oge mmụba.

Ngwọta: Mee nnwale kacha mma ka ịchọta ọnọdụ kacha mma maka nhazi PCR gị.

Na nchịkọta

Nchọpụta nsogbu aPCR analyzernwere ike ịbụ ọrụ na-agwụ ike, mana ịghọta nsogbu ndị a na-ahụkarị na ngwọta ha nwere ike ịkwalite ahụmịhe PCR gị nke ukwuu. Site na idozi nsogbu ndị a na-ahụkarị, ndị na-eme nchọpụta nwere ike imeziwanye nsonaazụ PCR ma hụ na nsonaazụ a pụrụ ịdabere na ya na ngwa ihe ọmụmụ ihe omimi. Nlekọta oge niile, nhọpụta nke reagents nke ọma, na njikarịcha ọnọdụ mmeghachi omume bụ igodo maka nyocha PCR na-aga nke ọma.