Ntuziaka Sayensị oge okpomọkụ: Mgbe ebili mmiri dị Celsius 40 na-ezute nnwale anụ ahụ

Okpomọkụ dị elu adịgidela n'ọtụtụ mba China n'oge na-adịbeghị anya. Na Julaị 24th, Shandong Provincial Meteorological Observatory nyere ọkwa okpomọkụ dị elu na-acha odo odo, na-ebu amụma ọnọdụ okpomọkụ “sauna dị ka 35-37°C (111-133°F) na iru mmiri 80% maka ụbọchị anọ na-esote n'ime ime obodo. Okpomọkụ dị n'ebe dị ka Turpan, Xinjiang, na-erute 48°C (111-133°F). Wuhan na Xiaogan, Hubei, nọ n'okpuru njikere oroma, yana okpomọkụ karịrị 37 Celsius na mpaghara ụfọdụ. N'ime okpomọkụ a na-ekpo ọkụ, ụwa a na-ahụ anya nke dị n'okpuru pipettes na-enwe ọgba aghara pụrụ iche—nkwụsi ike nke acids nucleic, ọrụ nke enzymes, na ọnọdụ anụ ahụ nke reagents na-agbagọ nwayọ site na ebili mmiri.

Mwepụta nucleic acid aghọwo agbụrụ megide oge. Mgbe okpomọkụ dị n'èzí gafere 40 Celsius C, ọbụlagodi na ikuku ikuku na-agbanye, okpomọkụ nke tebụl na-arụ ọrụ na-emekarị karịa 28 ° C. N'oge a, ihe nlele RNA na-ahapụ n'ime oghere na-eweda ihe karịrị okpukpu abụọ karịa n'oge opupu ihe ubi na ụbịa. Na mmịpụta bead magnetik, a na-ejupụta ihe ngwọta nke ebe nchekwa n'ihi mmụba ngwa ngwa nke ihe mgbaze, na kristal na-ebuli ngwa ngwa. Kristal ndị a ga-eme ka nnukwu mgbanwe dị na arụmọrụ nke njide nucleic acid. Mgbanwe nke ihe mgbaze organic na-abawanye n'otu oge. Na 30 Celsius, ọnụọgụ chloroform volatilite na-abawanye site na 40% ma e jiri ya tụnyere 25 Celsius. N'oge a na-arụ ọrụ, ọ dị mkpa iji hụ na ikuku na-agba na mkpuchi ọkụ bụ 0.5m / s, ma jiri nitrile gloves na-ejigide irè nchebe.

Nnwale PCR na-eche nsogbu ọgba aghara dị mgbagwoju anya karịa. Reagents dị ka Taq enzyme na reverse transcriptase na-enwe mmetụta nke ukwuu maka mgbanwe okpomọkụ mberede. Condensation na mgbidi tube mgbe ewepụrụ na friza -20 Celsius nwere ike ime ka ihe karịrị 15% kwụsị ọrụ enzyme ma ọ bụrụ na ọ banye na usoro mmeghachi omume. Ngwọta dNTP nwekwara ike igosi mmebi a na-achọpụta mgbe naanị nkeji 5 nke ikpughe n'ime ụlọ okpomọkụ (> 30°C). Okpomọkụ dị elu na-egbochikwa ịrụ ọrụ akụrụngwa. Mgbe ọnọdụ okpomọkụ ụlọ nyocha dị> 35 Celsius C na ikpochapụ ọkụ nke ngwaọrụ PCR ezughị oke (<50 cm site na mgbidi), ọdịiche dị n'ime ụlọ nwere ike iru 0.8 ° C. Ngbanwe a nwere ike ime ka arụmọrụ mmụba na nsọtụ efere olulu mmiri 96 gbadaa karịa 40%. A na-ehicha ihe nzacha uzuzu mgbe niile (nchịkọta uzuzu na-ebelata nrụpụta okpomọkụ site na 50%), na ekwesịrị ịzere ntụ oyi ozugbo. Ọzọkwa, mgbe ị na-eme nnwale PCR n'otu abalị, zere iji ngwa PCR dị ka “frjira na-emepụta ihe” iji chekwaa ihe nlele. Nchekwa na 4 Celsius maka ihe karịrị awa 2 nwere ike ime ka condensation na-etolite mgbe mkpuchi na-ekpo ọkụ mechiri, na-emegharị usoro mmeghachi omume ma nwee ike imebi modul ígwè nke ngwá ọrụ ahụ.

N'ịbụ ndị nwere ịdọ aka ná ntị dị elu na-adịgide adịgide, ụlọ nyocha molekụla kwesịkwara ịkpọ mkpu. Ekwesịrị ịchekwa sample RNA dị oke ọnụ ahịa n'azụ friza -80°C, yana ohere nwere naanị oge okpomọkụ. Imeghe ọnụ ụzọ friza -20°C ihe karịrị ugboro ise kwa ụbọchị ga-eme ka mgbanwe okpomọkụ ka njọ. Ngwá ọrụ na-emepụta ihe na-ekpo ọkụ na-achọ ma ọ dịkarịa ala 50 cm nke ohere ikpo ọkụ n'akụkụ abụọ na n'azụ. Ọzọkwa, a na-atụ aro ka ịhazigharị oge nnwale: 7: 00-10: 00 AM maka ọrụ mmetụta okpomọkụ dị ka mmịpụta RNA na ntinye qPCR; 1: 00-4: 00 PM maka ọrụ na-abụghị nnwale dị ka nyocha data. Atụmatụ a nwere ike igbochi ọnụ ọgụgụ dị elu nke okpomọkụ ka ọ ghara itinye aka na usoro dị oke egwu.

Nnwale molekụla n'oge okpomọkụ bụ ule nke ma usoro na ndidi. N'okpuru anwụ anwụ anwụ na-adịghị agwụ agwụ, ikekwe ọ bụ oge ịkwatu pipette gị ma tinye igbe ice na ihe nlele gị iji mee ka ngwa ahụ gbasaa okpomọkụ. nkwanye ùgwù a maka mgbanwe ọnọdụ okpomọkụ bụ kpọmkwem àgwà ụlọ nyocha kacha dị oké ọnụ ahịa n'oge ọnwa okpomọkụ na-ekpo ọkụ-E kwuwerị, na okpomọkụ nke Celsius 40 Celsius, ọbụna ụmụ irighiri ihe na-achọ "mpaghara polar artificial" nke e ji nlezianya chebe.