Nduzi Sayensị Oge Okpomọkụ: Mgbe Okpomọkụ 40°C Zutere Nnwale Molekụla

Okpomọkụ dị elu anọgidewo na-adịgide n'ọtụtụ ebe na China n'oge na-adịbeghị anya. Na Julaị 24, Shandong Provincial Meteorological Observatory wepụtara ọkwa okpomọkụ dị elu odo odo, na-ebu amụma na okpomọkụ "dị ka sauna" nke 35-37°C (111-133°F) na iru mmiri 80% maka ụbọchị anọ sochirinụ n'ime obodo. Okpomọkụ dị n'ebe dịka Turpan, Xinjiang, na-eru nso 48°C (111-133°F). Wuhan na Xiaogan, Hubei, nọ n'okpuru mkpu oroma, ebe okpomọkụ karịrị 37°C n'ebe ụfọdụ. N'okpomọkụ a na-ekpo ọkụ, ụwa dị obere n'okpuru elu pipettes na-enwe nsogbu pụrụ iche - nkwụsi ike nke nucleic acid, ọrụ nke enzymes, na ọnọdụ anụ ahụ nke reagents niile na-agbagọ nwayọ site na okpomọkụ.

Mwepụta acid Nucleic aghọọla ihe na-agba ọsọ megide oge. Mgbe okpomọkụ dị n'èzí gafere 40°C, ọbụlagodi na igwe oyi na-agba, okpomọkụ nke tebụl ọrụ na-adịkarị elu karịa 28°C. N'oge a, ihe nlele RNA ndị a hapụrụ n'èzí na-emebi ihe karịrị ugboro abụọ ngwa ngwa dịka na oge opupu ihe ubi na oge mgbụsị akwụkwọ. Na mwepụta bead magnet, ihe ngwọta buffer na-ejupụta n'ógbè ahụ n'ihi mbelata ngwa ngwa nke ihe mgbaze ahụ, kristal na-apụtakwa ngwa ngwa. Kristal ndị a ga-akpata nnukwu mgbanwe na arụmọrụ nke ijide nucleic acid. Mgbanwe nke ihe mgbaze organic na-abawanye n'otu oge. Na 30°C, ọnụọgụ nke volatilization chloroform na-abawanye site na 40% ma e jiri ya tụnyere 25°C. N'oge ọrụ, ọ dị mkpa ijide n'aka na ọsọ ikuku na mkpuchi anwụrụ ọkụ bụ 0.5m/s, ma jiri uwe aka nitrile iji nọgide na-enwe irè nchebe.

Nnwale PCR na-eche nsogbu okpomọkụ dị mgbagwoju anya karị. Ihe ndị na-eme ka ihe dị ka Taq enzyme na reverse transcriptase na-enwe mmetụta dị ukwuu na mgbanwe okpomọkụ mberede. Mkpọchi na mgbidi tube mgbe ewepụchara ya na friza -20°C nwere ike ibute ihe karịrị 15% mfu ọrụ enzyme ma ọ bụrụ na ọ banye na sistemụ mmeghachi omume. Ngwọta dNTP nwekwara ike igosi mmebi a na-achọpụta mgbe naanị nkeji ise nke ikpughe na okpomọkụ ụlọ (>30°C). Okpomọkụ dị elu na-egbochikwa ọrụ ngwaọrụ. Mgbe okpomọkụ gburugburu ụlọ nyocha dị >35°C na mwepụ okpomọkụ nke ngwa PCR ezughi oke (<50 cm site na mgbidi), ọdịiche okpomọkụ dị n'ime nwere ike iru 0.8°C. Ngbanwe a nwere ike ime ka arụmọrụ mmụba na nsọtụ efere olulu 96 daa karịa 40%. Ekwesịrị ịsacha nzacha uzuzu mgbe niile (nchịkọta uzuzu na-ebelata arụmọrụ mwepụ okpomọkụ site na 50%), a ga-ezerekwa ntụ oyi ozugbo. Ọzọkwa, mgbe ị na-eme nnwale PCR n'abalị, zere iji ngwa PCR dị ka "friji emere eme" iji chekwaa ihe nlele. Nchekwa na okpomọkụ 4°C ruo ihe karịrị awa abụọ nwere ike ime ka mmiri ghara ịpụta mgbe mkpuchi ọkụ mechiri, na-agbaze sistemụ mmeghachi omume ma nwee ike imebi modulu ígwè nke ngwa ahụ.

N'agbanyeghị ịdọ aka ná ntị dị elu na-aga n'ihu, ụlọ nyocha molekul kwesịkwara ịkpọ mkpu. A ga-echekwa ihe nlele RNA dị oke ọnụ ahịa n'azụ friza -80°C, ebe ohere ịnweta ya ga-abụ ihe a na-agaghị ekwe omume n'oge okpomọkụ dị elu. Imepe ọnụ ụzọ friza -20°C ihe karịrị ugboro ise n'ụbọchị ga-eme ka mgbanwe okpomọkụ ka njọ. Ngwa ndị na-emepụta okpomọkụ dị elu chọrọ opekata mpe 50 cm nke oghere mkpofu okpomọkụ n'akụkụ abụọ na n'azụ. Ọzọkwa, a na-atụ aro ka ịhazi oge nnwale: 7:00-10:00 nke ụtụtụ maka ọrụ ndị na-emetụta okpomọkụ dị ka mwepụ RNA na ibu qPCR; 1:00-4:00 nke ehihie maka ọrụ na-abụghị nnwale dị ka nyocha data. Atụmatụ a nwere ike igbochi oke okpomọkụ dị elu itinye aka na usoro dị mkpa.

Nnwale molekul n'oge okpomọkụ bụ ule nke ma usoro ma ndidi. N'okpuru anyanwụ oge okpomọkụ na-adịghị akwụsị akwụsị, ikekwe oge eruola itinye pipette gị ma tinye igbe ice ọzọ na ihe nlele gị iji kwe ka ngwa ahụ gbazee okpomọkụ karịa. Nkwanye ùgwù a maka mgbanwe okpomọkụ bụ kpọmkwem àgwà ụlọ nyocha kachasị mma n'oge ọnwa okpomọkụ na-ekpo ọkụ - e kwuwerị, na okpomọkụ 40°C nke oge okpomọkụ, ọbụna molekul chọrọ "mpaghara polar artificial" nke a na-echekwa nke ọma.